分光光度法与衡量法在移液器校准中的优劣探讨(上)
分光光度法与衡量法在移液器校准中的优劣探讨(上)
在开始讨论此话题之前,我们应先简单了解下什么是移液器,其功能是什么,以及在校准过程中,哪些因素会影响其校准结果。
移液器,顾名思义,即是可以实现液体转移功能的仪器,当然,目前的移液器不仅仅能够实现液体的转移,而且还要能够实现转移过程中的精确计量,因此,移液器的校准,便是对其基础功能以及计量结果的检验。移液器的液体转移功能,可以通过视觉观察来判断,但其计量的结果,则需要通过本文即将探讨的方法来检测、验证。
目前,针对移液器计量结果的检测、验证,主流或主要的方法是采用衡量法,有时也被称之为“称重法”。之所以被通称为“称重法”是因为该方法的原理是通过电子天平对移液器计量的一定容量的液体进行称重,并以此数据为依据从而推断出移液器计量结果的实际值。依据此原理,显然移液器的校准过程极容易受到如下因素的影响。
1 温度,因为液体的体积是会受温度的影响而改变的,因此,一定质量的液体,在不同的温度下,其体积也是不同的,这就导致利用移液器计量一定容量的液体时,会因为温度的升高,而导致天平读数即质量下降,从而据此结果推断出的移液器的容量将小于实际容量;
2 气压,在不同的大气压力下,相同质量的液体其体积也是不同的,但通常这种差异非常轻微,甚至可以忽略;
3 用于称量的高精度电子天平的水平度、稳定性以及被称量物品放在电子天平托盘上的位置等,均会影响称量结果;
4 操作人员的操作习惯带来的影响;
5 测量仪器如电子天平、温度计等自身的误差带来的影响;
6 环境的相对湿度对带测量液体带来的影响;
由此可见,采用传统的衡量法对移液器进行校准,将会受到来自环境、人员以及测量仪器/设备等多方面因素的影响,为此,很多移液器校准实验室不得不从以上会对校准结果产生影响的各种因素着手去设计、控制实验室的环境,这样做可以最大限度地将上述因素带来的影响降低到最低。但这样做的同时,将导致一个新的、实际的问题产生,即是在专业的校准实验室里面获得的校准数据是否适用于移液器的实际使用场所使用?也即是这些由专业的实验室里出具的校准报告或者检定报告能否真实反应移液器在终端用户处所能表现出来的性能?因为终端用户处的环境,是千差万别的,有的甚至高于这些专业的实验室,但更多的则是远远低于这些专业的实验室,那么由这些专业实验室里获得的数据,就不能或者很难在终端用户处得到再现。
事实上也正是如此!很多情况下,在专业的实验室里测试合格的移液器,当终端用户在自己的工作场所重新校准时,则发现其结果并不理想,这不是移液器自身的问题,实际上是因为测试的场所改变了,环境改变了,上述影响校准结果的各种因素也改变了!而解决这一问题的最有效的办法就是直接去到终端用户的实际使用场所去对用户使用的移液器进行校准,这样得到的校准结果才是最有效的,对特定的用户来说,也才是最真实的!
为此,我们当然可以将专业的实验室的配备,如高精度电子天平、专业技术人员、环境控制的等各种设备搬迁至终端用户处进行校准,但这显然是不经济的,也是行不通的。因为有些仪器,比如高精度电子天平,一旦离开了原本固定的使用场所,是需要重新检定后才可以使用的。那么是否有另一办法可以高效的、简便的解决这个问题呢?这就是下文要与各位探讨的一种全新的移液器校准方法____分光光度法!
什么是分光光度法校准?
请见《分光光度法与衡量法在移液器校准中的优劣探讨(下)》
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