| 两款荧光显微镜的使用心得
作者：符薇，复旦大学生物医学研究院
说到生物，大家就会想到一个一个形态各异的细胞。但是要观察细胞形态的细微变化，一架性价比高的显微镜是必不可少的。 从列文虎克发明第一架光学显微镜至今，显微镜为了满足观察者的需要而不断更新换代。目前，生物细胞培养最常用的就是荧光显微镜，可以用于观察绿色，红色和蓝色三种荧光。 另外，从观察活细胞角度和固定细胞角度，又可以分为倒置显微镜和正置显微镜两种。
先说说奥林巴斯的荧光显微镜，我使用的机器型号是OLYMPUS BX51（图片来自网络）。
之所以很多人选择奥林巴斯的荧光显微镜，很大程度上是因为他们家的软件设计的相当人性化。这款软件功能非常强大，从图像拍摄到图像后处理一步到位，可以满足你所能想到和想不到的多种拍摄细节要求。在图像获取方面，该软件的活图采集像素比较高，而且清晰度也很不错，另外还配有图像锁定按钮，很方便将观察区域进行锁定，方便多张相片的采集。在准备拍摄的时候，首先要做好照片的白平衡，这个对任何拍摄都十分重要。奥林巴斯的荧光显微镜设计了两种白平衡调节模式，在白光模式下，以1cm左右的正方形聚焦框为中心，选择周边一键接触式（one touch）或者周边区块选择模式，都可以很容易的完成白平衡的设置。在荧光模式下，则聚焦框需要缩小到荧光区域，然后才可以进行白平衡校正。另外，他家的镜头也相当清晰，还配有活图拍摄模式，支持一段时间的动画拍摄，只要设好拍摄时间范围，配上培养盒就可以实现活细胞的动态拍摄。在图像处理方面，功能也比较齐全，可以加注标尺，也可以实现多色图片的重叠效果制作，而且界面非常友好，对photoshop不太熟悉的拍摄者，如果有了这个软件，一定会觉得方便很多。据说奥林巴斯的荧光显微镜软件在前几年销量非常好，但近几年受到盗版的影响，销售量迅速下滑。毕竟这套价值数万的软件，除了功能强大外，售价也相当不菲，很多销售代理奥林巴斯的荧光显微镜的公司为了降低成本，也常常给客户安装盗版的软件，才影响了该软件的销售量。 说了那么多优点，奥林巴斯的荧光显微镜的缺点究竟是什么呢？我觉得是40倍以上图像的清晰度问题，因为超过20倍以上的物镜，其观察的清晰度就会受到影响。虽然他家也提供镜头切换模式，但效果改善不太明显。不过如果大家不介意试试油镜的话，奥林巴斯的荧光显微镜提供了100倍物镜，在滴上油后的拍摄效果可以令大家满意，甚至于细胞内的小型细胞器和转染产生的荧光小颗粒有时都可以观察得非常清楚，可以为文章发表提供很好的证据支持。
另一个要说的就是最近我们才添置的Leica荧光显微镜，型号为Leica DMI 300B（图片来自网络）。
说实话，我是在最近使用中才了解这个德国牌子的产品，产品的外观感觉还是不错的。据他们工程师说，他们的镜头性价比是比较高的，在使用中我也觉得他家的镜头清晰度可以算是中低价位产品中的佼佼者。而且对于那些经费不是很充分的实验室，买一个倒置显微镜，也可以同时要求工程师帮忙做一下小的改装，就可以作为一台正倒置两用机器，也不失是一种不错的选择。但是有一个致命的弱点，就是他家的软件，超级的不好用。虽然提供中英文两种界面，但有很多缺点，首先白平衡的调节比较粗糙，另外不支持动态动画的拍摄，还有就是活图的捕捉像素过低，常常造成图片显现迟缓和焦距对不准的现象。在图像的后续处理，也功能超少，必须借助photoshop等其他软件的帮助，所以我只能说Leica荧光显微镜是一台软硬件相当不匹配的设备，我个人非常的不推荐他家的软件。如果要装一个奥林巴斯的软件，他家的工程师收费比较高，个人觉得有点坑人。
眼睛是心灵的窗户，而显微镜则是生物工作者的灵魂马车，可以帮助我们通往更多神秘未知的生物领域。我们不仅要懂得选择，还要懂得如何去驾驭这座马车，才能达到事半功倍的效果。好的镜头加上好的软件，才是两股有力的缰绳，缺一不可。如何DIY一台性价比高的显微观察设备，我的建议是货比三家，综合考虑，从成本到效益多方考虑，再作出一个符合自身定位的决定。
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